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王经理 先生
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发布时间:2020-07-19 16:26:16
培养基的制备
1.胰酪大豆胨液体培养基
胰酪胨17.0克
氯化钠5.0克
大豆木瓜蛋白酶消化物3.0克
磷酸氢二钾2.5克
葡萄糖(一水合)2.5克
水1000mL
除葡萄糖外,取上述成分,混合,微温溶解,滤过,调节 pH 值使灭菌后在 25℃的 pH 值为 7.3±0.2,加入葡萄糖,分装,灭菌。
胰酪大豆胨液体培养基置 20~25℃培养。
2. 胰酪大豆胨琼脂培养基
胰酪胨15.0克
氯化钠5.0克
大豆木瓜蛋白酶水解物5.0克
琼脂15.0克
水1000ml
除琼脂外,取上述成分,混合。微温溶解,调节 pH 值使灭菌后在 25℃的 pH 值为 7.3±0.2,微生物检测,加入琼脂,加热溶化后,摇匀,微生物的检测,分装,灭菌。
3.沙氏葡萄糖液体培养基
沙氏葡萄糖琼脂培养基照微生物限度检查法(附录ⅩⅢ C)制备。
——微生物培养——
指将微生物接种到培养基内,经一定条件使微生物生长繁殖。接种的方法有 6种。①涂布法:将纯菌或含菌材料均匀地涂布在固体培养基表面。②划线法:用接种环沾取含菌材料,在固体培养基表面划线。③倾注法:取少许含菌材料放入无菌培养皿中,然后倾入已融化并已冷却至48℃左右的琼脂灭菌培养基,摇匀后冷却凝固。④点植法:用接种针在固体培养基表面接触几点。⑤穿刺法:用接种针沾取的微生物经穿刺而进入半固体深层培养基中。⑥浸洗法:用接种针挑取含菌材料,在液体培养基中洗下。培养方法则根据微生物对氧的要求情况分为需氧和厌氧两种。需氧培养是指必须在有氧环境中进行培养,必要时用振荡或通气搅拌达到充分供氧;厌氧培养是培养过程一直保持在少氧或无氧的环境中。厌氧的方法可用物理、化学、生物等办法使培养容器内的氧气部分或全部消除。通常用抽真空方法,有时将两种方法结合使用,使厌氧培养更为理想。接种、培养是食品微生物应用、研究过程中基本和必不可少的方法。
计数方法
计数方法包括平皿法、薄膜过滤法和可能数法(Most-Probable-Number Method,简称MPN法)。MPN 法用于微生物计数时jing确度较差,但对于某些微生物污染量很小的供试品,MPN法可能是更适合的方法。
供试品检查时,微生物的检测方法,应根据供试品理化特性和微生物限度标准等因素选择计数方法,检测的样品量应能保证所获得的试验结果能够判断供试品是否符合规定。所选方法的适用性须经确认。
计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性试验
供试品微生物计数中所使用的培养基应进行适用性检查。
供试品的微生物计数方法应进行方法适用性试验,以确认所采用的方法适合于该产品的微生物计数。
若检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时,计数方法应重新进行适用性试验。
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