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微生物限度检查

3.MPN 法

取规定量供试品，按方法适用性试验确认的方法进行供试液制备和供试品接种，所有试验管在30～35℃培养3～5天，空气微生物检测，如果需要确认是否有微生物生长，微生物检测，按方法适用性试验确定的方法进行。记录每一稀释级微生物生长的管数，从表3査每1g 或1ml供试品中需氧菌总数的可能数。

结果判断

需氧菌总数是指胰酪大豆胨琼脂培养基上生长的总菌落数（包括***菌落数）；霉菌和酵母菌总数是指沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的总菌落数（包括***菌落数）。若因沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的***使霉菌和酵母菌的计数结果不符合微生物限度要求，可使用含kang生素（如氯霉su、庆大霉su）的沙氏葡萄糖琼脂培养基或其他选择性培养基（如玫瑰红钠琼脂培养基）进行霉菌和酵母菌总数测定。使用选择性培养基时，应进行培养基适用性检查。若采用MPN法，测定结果为需氧菌总数。

非无菌***微生物限度标准

4.非无菌含***原粉的中药制剂的微生物限度标准见表2。

5.非无菌***原料及辅料的微生物限度标准见表3。

6.中药提取物及中药饮片的微生物限度标准见表4。

7. 有兼用途径的制剂

应符合各给药途径的标准。

非无菌***的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法（通则1105）” 检查；非无菌***的控制菌照“非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法（通则1106）” 检查。各品种项下规定的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数标准解释如下：

l0^1cfu：可接受的***大菌数为20；

10^2cfu：可接受的***大菌数为200；

10^3cfu：可接受的***大菌数为2000；依此类推。

本限度标准所列的控制菌对于控制某些***的微生物质量可能并不quan面，因此，对于原料、辅料及某些特定的制剂，根据原辅料及其制剂的特性和用途、制剂的生产工艺等因素，可能还需检查其他具有潜在危害的微生物。

微生物保存

基本原理是在挑选优良纯培养物并使其处于休眠状态基础上，人为地创造一个有利于休眠的环境，水质微生物检测，使其长期保存后仍能保持zhong原有的优良特性。基本措施是低温、真空、干燥。

保藏方法：

1、定期移植法

亦称传代培养保藏法，指将junzhong接种于适宜的斜面培养基上，适条件下培养，完成培养于4～6℃进行保存并间隔一定时间(3-6个月)进行移植培养的一种短期种保藏方法。

2、液体石蜡法

指将junzhong接种在适宜的斜面培养基上，适条件下培养好后注入灭的液体石蜡，使其覆盖整个斜面，水中微生物检测，再直立放置于低温(4～6℃)干燥处进行保存的一种保藏方法。

3、真空冷冻干燥法

指将保藏的junzhong细胞或孢子悬浮于保护剂中，经预冻后在真空条件下使水分升华，再经真空封存后保存的一种长期保存方法。

4、-80℃低温法

将junzhong悬浮于保护剂中，在－80℃冰箱中保存的一种长期保藏方法

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